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谷草轉氨酶(GOT)活性檢測意義!

發布時間: 2021-08-27  點擊次數: 2394次

谷草轉氨酶(GOT)活性檢測意義!

檢測意義:

GOT( 2.6.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,催化可逆轉氨基反應,是氨基酸代謝的重要酶。此外,GOT在心肌細胞中含量高,一般常作為心肌梗塞和心肌炎的輔助檢查。肝臟損害時其血清濃度也可升高。

GOT催化 α-同戊二酸和天門冬氨酸發生轉氨基反應,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸進一步自行脫羧生成丙酮酸;丙酮酸可與2,4-二硝基苯肼反應生成2,4-二硝基苯腙,在堿性條件下顯棕紅色;測定505nm吸光度的變化,即可計算GOT酶活力。

樣品測定準備 :

1、 細胞或微生物樣品的制備 : 

先收集細胞或微生物樣品到離心管內,棄上清,按照每250萬細胞或微生物加入0.25mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復30次)。3500g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、組織:

稱取約0.05g組織,加入0.5mL提取液進冰浴行勻漿。3500g  4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

3、血清(漿)樣品:直接檢測。

生物試劑的使用常識:

(1)試劑切忌與手接觸(有些試劑有強腐蝕性、等特性)。

(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,絕對不允許用同一種工具同時連續取用多種試劑。取完一種試劑后,應將工具洗凈(藥勺要擦干)后,才可取用另一種試劑。

(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后請及時將瓶放回原處,以免遺忘,帶來不便。

(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(怕產生原試劑的再次污染)。


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